小鼠原代肝窦内皮细胞的三种提取方法

    肝窦内皮细胞(L iver Sinusoidal Endothelial Cells)属于肝脏中的非实质性细胞,在肝脏中起到屏障、物质代谢、超滤内吞,抗原呈递等作用。近年来国内外学者对肝窦内皮细胞分离方法进行了大量的研究,但要获得纯度高，细胞活性好,功能稳定的肝窦内皮细胞仍很困难，尤其是小鼠肝窦内皮细胞。由于小鼠品系丰富可以更充分的满足各类研究的需要,所以获得细胞活性好的小鼠肝窦内皮细胞具有重要意义。

　　目前，小鼠原代肝窦内皮细胞采用以下三种提取方法:两步原位灌流结合密度梯度离心法、机械分离结合酶消化及密度离心法、免疫磁珠分选及流式分选法。两步原位灌流结合密度梯度离心法主要集中于大鼠，由于技术条件的限制,较少应用于小鼠的肝窦内皮细胞分离,且该方法无法将肝窦内皮细胞和枯否细胞(kupffer cells)分离，导致最终获得的细胞纯度受到影响;机械分离结合酶消化及密度离心法对细胞损伤过大,且会造成组织块表面消化过度,内部消化不足;免疫磁珠分选及流式分选法所得到的小鼠肝窦内皮细胞虽然纯度高，但是由于肝窦内皮细胞缺乏特异性的表面标志物，使得细胞获得量少，且细胞分选前必须加上某些化学标记有可能造成细胞的分化或凋亡，同时其昂贵的仪器及试剂费用限制了在賂个实验室的应用。