大鼠原代乳腺上皮细胞的培养条件如下:
培养基成分:通常使用含胎牛血清(FBS)、生长添加剂、青霉素(Penicillin)和链霉素(Streptomycin)的专用培养基。这些成分能够为细胞提供必要的营养和生长因子,同时防止细菌污染。
培养环境:
温度:37℃。
气体条件:95%空气 + 5%二氧化碳(CO₂)。这种气体环境有助于维持培养基的pH值稳定,促进细胞生长。
包被条件:为了增强细胞的贴壁性,培养器皿表面常需进行包被处理。常用的包被材料包括鼠尾胶原Ⅰ(浓度为2-5μg/cm²)、多聚赖氨酸(PLL,0.1mg/ml)或明胶(0.1%)。
换液频率:建议每2-3天更换一次新鲜培养基,以提供充足的营养物质,并去除代谢废物,维持细胞健康生长。
传代比例与方法:
传代比例:一般按1:2的比例进行传代。
消化液:使用0.25%胰蛋白酶进行消化,使细胞从培养器皿表面脱离。
操作:消化后,需轻轻吹打细胞,使其成为单细胞悬液,然后进行离心、重悬,并接种到新的培养器皿中。
大鼠原代乳腺上皮细胞生长特性:
生长方式:贴壁生长。
细胞形态:呈上皮细胞样,多角形。
传代代数:由于是原代细胞,体外培养周期有限,一般可传1-2代。