小鼠原代肝窦内皮细胞（mouse primary liver sinusoidal endothelial cells,LSECs）是从小鼠肝脏中分离获得的肝窦腔内皮细胞，构成肝窦壁的主要细胞成分，在肝脏生理和病理过程中发挥关键作用。LSECs具有独特的窗孔结构、高内吞活性以及免疫调节功能，是研究肝脏物质交换、免疫耐受、肝纤维化、肝癌等的重要细胞模型。 小鼠原代肝窦内皮细胞的形态特征为：扁平、不规则多边形，细胞边缘薄，中央有核；表面有大量直径约100‑150 nm的窗孔，呈筛板状排列；表达特异性标志物如CD31、CD34、LYVE‑1、Stabilin‑2等。功能上，LSECs负责血液与肝细胞之间的物质交换；通过内吞作用清除血液中的大分子废物；分泌细胞因子调节肝内免疫微环境；参与肝再生和血管生成。
LSECs的分离通常采用两步酶消化结合密度梯度离心或磁珠分选。取健康小鼠肝脏，经灌注消化（常用胶原酶Ⅳ、蛋白酶）获得肝细胞悬液，再通过低速离心、Percoll梯度离心或CD31磁珠阳性分选富集LSECs。原代LSECs可在胶原或明胶包被的培养皿上贴壁生长，培养基常用ECM基础培养基添加内皮细胞生长因子、肝素、胎牛血清等。LSECs体外培养寿命较短，一般仅能维持1‑2周，窗孔结构易丢失。
在应用领域方面，小鼠原代肝窦内皮细胞主要用于肝脏疾病机制研究，如肝纤维化模型中LSECs的窗孔减少与肝星状细胞活化关系；肝癌研究中LSECs对肿瘤细胞侵袭、转移的影响；药物肝毒性评价，因为LSECs是药物首过代谢的重要场所；肝脏免疫学研究，如LSECs对T细胞、NK细胞的调节作用；以及肝组织工程中血管化构建。
小鼠原代肝窦内皮细胞的研究价值在于：揭示肝脏微循环的细胞基础；阐明肝病发生发展的内皮机制；为肝靶向药物递送提供理论依据；为肝移植免疫耐受提供新思路。然而，其应用也存在难点：分离纯化技术复杂，易混杂其他细胞；体外培养难以保持窗孔表型；细胞量有限，难以大规模实验。
培养LSECs的关键注意事项包括：选用年轻小鼠（6‑8周）以获得活性更高的细胞；严格控制消化时间和温度，避免细胞损伤；尽快进行分选或梯度离心，减少其他细胞黏附；使用专用内皮培养基，添加适当生长因子；培养环境保持低氧（3‑5%O₂）有助于维持窗孔结构。细胞鉴定需通过形态观察、标志物免疫荧光或流式检测。
随着单细胞测序、活细胞成像技术的发展，小鼠原代肝窦内皮细胞的研究正朝着精细化、动态化、多组学整合方向迈进。未来，通过建立LSECs永生化细胞系、开发3D共培养模型、结合基因编辑技术，将更深入揭示其在肝脏生理病理中的功能，并为肝病治疗提供新靶点。
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更新时间：2026-04-19
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