小鼠原代星形胶质细胞的特性及处理方法

　　小鼠原代星形胶质细胞是胶质细胞中体积大的一种。用经典的金属浸镀技术（银染色）显示此类胶质细胞呈星形，从胞体发出许多长而分支的突起，伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间，起支持和分隔神经细胞的作用。

　　纤维性星形胶质细胞多分布在脑脊髓的皮质，突起细长，分支较少，胞质中含，多分布在灰质，细胞突起粗短，分支多。胞质内胶质丝较少，又称苔状细胞。电镜下星形胶质细胞的胞核有缺失，胞质较清亮，游离核糖核蛋白体和粗面内质网均很少，糖原颗粒丰富，有大量的胶质丝。纤维形星形胶质细胞的突起呈长圆柱形，而原浆性星形胶质细胞的突起呈薄片状，并常包裹着神经细胞及其突触。星形胶质细胞的脚板与血管内皮细胞之间相隔一层基板，脚板质膜与基板接触处有半桥粒结构。

　　小鼠原代星形胶质细胞的特性：

　　1、组织来源于实验动物的正常脑组织。

　　2、细胞鉴定：神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色法。

　　3、经鉴定细胞纯度高于90%。

　　4、不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

　　5、细胞生长方式：星状细胞，贴壁培养。

　　细胞处理：

　　1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

　　2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

　　3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。