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小鼠胚胎成纤维细胞MEF

小鼠胚胎成纤维细胞MEF

简要描述:
小鼠胚胎成纤维细胞MEF
取孕9天的615小鼠胚胎,去除脑、心脏等培养建立。该细胞可用作饲养层细胞,支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时,MEF需经丝裂mei素C处理停止生长。建议作为ES细胞的饲养层时,MEF不要超过6代。

更新时间:2021-11-29

访问量:184

产品型号:AW-mic-048

厂商性质:生产厂家

品牌其他品牌应用领域医疗卫生,生物产业

小鼠胚胎成纤维细胞MEF 种属鉴定 安为生物

小鼠胚胎成纤维细胞MEF

MEF【MEF】

l 细胞鉴定

种属鉴定已通过

l 细胞来源

国家资源库

l 细胞背景

取孕9天的615小鼠胚胎,去除脑、心脏等培养建立。该细胞可用作饲养层细胞,支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时,MEF需经丝裂mei素C处理停止生长。建议作为ES细胞的饲养层时,MEF不要超过6代。

l 细胞特性

 

1) 来源:小鼠胚胎

2) 形态:成纤维细胞样,贴壁生长

3) 含量:>1x106  细胞数

4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途:仅供科研使用

l 培养条件

1) 准备D/F12(推荐awcell-0005)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

l 注意事项

 

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10�S的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

l 运输形式

低温:(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

常温: (2) T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

l 生物安全

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

 

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