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人结肠癌细胞  HT-29

人结肠癌细胞 HT-29

简要描述:
HT-29 人结肠癌细胞,1964年源自一位44岁白人女性,HT-29细胞系由J.Fogh用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离。近来,已建株的培养细胞用含血清McCoy’s 5A培液培养。在裸鼠中;形成与结肠原发性(I 级)一致的分化良好的腺癌;用类固醇治疗的仓鼠也会形成肿瘤。

更新时间:2021-10-11

访问量:115

产品型号:HT29

厂商性质:生产厂家

品牌其他品牌应用领域医疗卫生,生物产业


 

HT-29 人结肠癌细胞

 

HT-29HT29

细胞鉴定

STR鉴定已通过

细胞来源

国家资源库

细胞背景

1964源自一位44岁白人女性HT-29细胞系由J.Fogh用移植培养方法和含15%FBSF12培养液从原发性肿瘤分离。近来,已建株的培养细胞用含血清McCoys 5A培液培养。在裸鼠中;形成与结肠原发性(I 级)一致的分化良好的腺癌;用类固醇治疗的仓鼠也会形成肿瘤

注意:在 PubMed= 11921276 中指出起源于肠直肠乙状结肠部分的腺癌,但仅在最早的出版物 (DOI= 10.1007/978-1-4757-1647-4_5 ) 中指出为结肠腺癌。

细胞特性

 

1) 来源:结肠癌

2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长

3) 含量:>1x106  细胞数

4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途:仅供科研使用。

培养条件

1)准备McCOY's 5A(推荐awcell-0011)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%.

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%

注意事项:

 

注意事项:HT-29复苏后第一周可能会有大量漂浮细胞,可更换新鲜培养液,同时将漂浮的细胞离心收集后加回到培养瓶中与贴壁细胞共同培养。新复苏的细胞会以补丁形态三维接触生长(即不是单层扁平生长),待细胞分裂生长后将会变回上皮细胞形态单层扁平生长。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T251-2mLT752-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

4)运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶12传代 。

运输形式

低温:11mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系

常温2 T25瓶复苏的存活细胞常温发货,到后按照细胞接收后的处理方法操作。

生物安全

 1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。


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