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品牌 | 安为 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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LLC 小鼠Lewis肺癌细胞
LLC【LLC】 | |
l 细胞鉴定 | 种属鉴定已通过 |
l 细胞来源 | 国家资源库 |
l 细胞背景 | Lewis肺癌是一种从C57BL小鼠的肺中建立的细胞系,该细胞带有原发性Lewis肺癌的植入所致的肿瘤,被广泛用作转移的模型,可用于研究癌症化学治疗剂的机制。 |
l 培养条件: | 1)准备DMEM(推荐awcell-0001)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1% 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
l 注意事项:
| 注意:此细胞贴壁不牢,生长前期悬浮细胞较多,后期贴壁细胞较多,建议传代和换液时回收培养基中悬浮的细胞。 该细胞为轻微贴壁和悬浮培养的细胞,传代可以参考以下方法: 1. 收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 |
l 运输形式: | 低温:(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 常温(2) T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 |
l 生物安全 | 1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。 |
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