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急性早幼粒细胞白血病细胞 NB4

急性早幼粒细胞白血病细胞 NB4

简要描述:
急性早幼粒细胞白血病细胞 从1989 年第二次复发的 23 岁急性早幼粒细胞白血病(APL = AML FAB M3)女性的骨髓中建立;细胞携带 t(15;17) PML-RARA 融合基因。提供外显子组和 RNA 序列数据(参见 Ref 18187 和外 显子组序列和RNA-Seq)

更新时间:2021-11-05

访问量:121

产品型号:nb4

厂商性质:生产厂家

品牌其他品牌应用领域医疗卫生,生物产业

急性早幼粒细胞白血病细胞

 

NB4

细胞鉴定

STR鉴定已通过

细胞来源

国家资源库

细胞特性

 

1.来源:骨髓

2.形态:圆形悬浮生长

3.含量:>1x106  细胞数

4.规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5.用途:仅供科研使用。

培养条件

1)准备1640培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%

注意事项:

 

1. 细胞复苏或传代后会有少部分的细胞贴壁和部分悬浮的细胞,复苏两天后细胞会从贴壁细胞向外开始生长,有时细胞再生长过程中,细胞会再贴壁细胞的上方生长,形成不同的细胞层,这种情况会有发生。 在细胞复苏的一周内,培养瓶中 通常会有悬浮的活的细胞团,在换液过程中不要丢弃在这些活的悬浮细胞,可以通过离心(125×g)回收细胞,重新打回到培养瓶中,分离或者丢弃漂浮的活细胞会使细胞数量变少,引起细胞的停滞生长或细胞死亡。

2.培养条件的细微变化,尤其是pH和培养基中血清的质量,可能会影响细胞的生长状况,在细胞的生长过程中会有细胞内的液泡出现,特别在细胞快要融合是会出现这种情况。培养细胞时使用未被灭活的高质量、低内毒素的胎牛血清,可以使细胞更好的贴壁和形成单层细胞。

3. 细胞在生长过程中可以通过将血清浓度提到到20%来改善细胞生长缓慢的情况。(参考atcc 有关该细胞的描述)

细胞培养

 

1)冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2) 细胞传代:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:21:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,半数培养基离心重悬后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:21:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例;

1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.

2.1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

3.将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

运输形式

低温:11mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系

常温2 T25瓶复苏的存活细胞常温发货,到后按照细胞接收后的处理方法操作。

生物安全

 1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

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