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应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1 种属鉴定
MC3T3-E1是一种小鼠胚胎成骨细胞前体细胞,源自C57BL/6品系的胚胎小鼠颅骨。这种细胞具有分化成为成骨细胞和骨细胞的能力,并能在体外形成钙化的骨组织。MC3T3-E1细胞系有多个亚克隆株,是研究成骨细胞分化、骨细胞生物学、骨代谢和骨肉瘤等疾病的理想材料,尤其适合研究胞外基质(ECM)信号通路的作用。细胞形态呈成纤维细胞样,贴壁生长,培养条件为5%CO2和37℃,常用培养液配方为MEMα培养基含核苷和GlutaMAX添加剂,添加10%胎牛血清FBS。传代周期约为3-4天,传代比例通常为1:3,换液频率为每2-3天一次。MC3T3-E1细胞在科研中广泛应用,用于骨质疏松症、骨肉瘤、牙齿发育和骨组织工程等领域的研究。细胞检测结果显示,MC3T3-E1不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等污染。
小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1 | |
l 细胞鉴定 | 种属鉴定已通过 |
l 细胞来源 | 国家资源库 |
l 细胞背景 | 从胚胎/胎儿 C57BL/6 小鼠的颅骨建立;文献中描述的分化为成骨细胞并产生胶原蛋白。该细胞有多个亚克隆,可以作为体外研究成骨细胞分化的良好模型。 |
l 培养条件: | 1) 准备MEMα(推荐awcell-0003)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 |
l 注意事项:
| 对于贴壁细胞传代可以参考以下方法: 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10�S的培养基来终止消化。 3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 |
l 运输形式: | 低温:(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 常温(2) T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 |
l 生物安全 | 1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。 |
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