小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1的培养操作步骤

小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1能够特异性表达成骨相关转录因子Runx-2和碱性磷酸酶等早期成骨分化表型标志物,已经被广泛应用于成骨分化的研究中。成骨细胞的来源主要有骨、骨膜、骨髓及骨外组织。及人的胚胎颅骨或新生动物的颅骨为成骨细胞的常用来源。小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1的培养操作步骤：1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；3．在距离紫外灯直射范围内20-3...

查看详情>>

小鼠成纤维细胞组织块的培养方法说明

成纤维细胞是疏松结缔组织中最常见而且数量较多的一种细胞，位于胶原纤维近旁并依附于其上。此细胞的形态结构可随其功能状态的不同而改变。在功能活动旺盛时，成纤维细胞的胞体较大，呈扁平星形，有突起。胞核呈卵圆形，核染色质较少，着色浅，核仁明显。胞质较多，弱硷性，内含丰富的粗面内质网、核蛋白体、高尔基复合体以及微丝和微管等结构，表明此种细胞具有合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白和多糖蛋白，形成胶原纤维、弹性纤维、网状纤维和基质的作用。在相对静止或功能活动不活跃时的细胞，称为纤维细胞。这种细胞...

查看详情>>

人膜间皮细胞使用前要做好哪些工作

间皮细胞就是构成间皮的细胞，间皮是由一层细胞组成的，胸膜，腹膜和器官相接的面上都有间皮细胞。间皮的作用是起到润滑作用，使身体内的器官与器官、器官与胸膜或与腹膜之间能得到良好的保护，不会因为互相磨损受伤。间皮的润滑和保护作用就是靠间皮细胞所分泌的细胞外基质、玻尿酸类物质做到的，所以间皮细胞就是身体内的正常细胞。人膜间皮细胞使用前要做好哪些工作：1）冻存人膜间皮细胞的复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL*培养基的离心管中混合均匀。在10...

查看详情>>

小鼠骨样细胞是维持成熟骨新陈代谢的主要细胞

小鼠骨样细胞是成熟骨组织中的主要细胞，相当于人的成年期，由骨母细胞转化而来。当新骨基质钙化后，细胞被包埋在其中。此时细胞的合成活动停止，胞浆减少，成为骨细胞。骨细胞能产生新的基质，改变晶体液，使骨组织钙、磷沉积和释放处于稳定状态，以维持血钙平衡。骨细胞对骨吸收和骨形成都起作用，是维持成熟骨新陈代谢的主要细胞。骨组织的细胞(小鼠骨样细胞)成分包括骨原细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞。只有骨细胞存在于骨组织内，其他三种细胞均位于骨组织的边缘。小鼠骨样细胞起源于成骨细胞。在骨形成的...

查看详情>>

人胚肾细胞293T的处理要注意以下几点

人胚肾细胞；293，上皮状，早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5（Ad5）基因组的左侧端和右侧端的DNA，但是明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现，Ad5的1～4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体，由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。人胚肾细胞293T的处理要注意以下几点：1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃...

查看详情>>

小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1的储存要注意的事项

从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆。从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。MC3T3亚克隆4（ATCCCRL-2593）和MC3T3亚克隆14（ATCCCRL-2594）在抗坏血酸和3到4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质（ECM）。MC3T3亚克隆24（ATCCCRL-2595)和MC3T3亚克隆30(ATCCCRL-2596)在抗坏血酸中生长表现出很差的成...

查看详情>>

小鼠成纤维细胞传代流程的注意事项

小鼠成纤维细胞分离自小鼠皮肤组织的贴壁细胞，成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞(mesenchymalcell)分化而来。功能活跃的细胞称为成纤维细胞。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。纤维细胞（fibrocyte），结缔组织中数目最多的细胞，相对静止的细胞称纤维细胞。成纤维细胞数目最多，胞体大，为多突的纺锤形或星形的扁平细胞，细胞核呈规则的卵圆形，细胞轮廓不清，具有突起。其形态尚可...

查看详情>>

介绍DC细胞的两种来源途径

树突状细胞（Dendriticcells,DC）是机体功能较强的专职抗原递呈细胞，它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原，未成熟DC具有较强的迁移能力，成熟DC能有效激活初始型T细胞，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。DC的来源有两条途径：①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC，称为髓样DC，也称DCl，与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞；包括朗格汉斯细胞，间皮（或真皮）DCs以及单核细胞衍生的DCs等，②来源于淋巴样干细胞，称为淋巴样DC或浆细胞样DC，即DC2，...

查看详情>>