小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的培养要注意的事项

小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)作为原代培养细胞，其刺激增殖的能力强且可靠、易培养、来源丰富，常被用作干细胞培养的饲养层。一方面提供刺激干细胞增殖的各种因子，另一方面保持干细胞的未分化状态。虽然MEF传代次数有限，但可早期冻存一些，不断复苏，保持长期使用。MEF的缺点是无法耐受G418的筛选。替代方法是从持续表达neo抗性的小鼠品系或转基因品系来分离培养MEF。利用各种转基因鼠培养的MEF细胞还是各种基因功能研究的良好工具。（一）材料12.5~14.5d的小鼠胚胎(3~6只小鼠／...

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一文带你了解什么是星形胶质细胞

星形胶质细胞，是哺乳动物脑内分布广泛的一类细胞，也是胶质细胞中体积最大的一种。用经典的金属浸镀技术（银染色）显示此类胶质细胞呈星形，从胞体发出许多长而分支的突起，伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间，起支持和分隔神经细胞的作用。细胞突起的末端常膨大形成脚板或称终足，有些脚板贴附在邻近的毛细血管壁上，因此这些脚板又被称为血管足或血管周足，靠近脑脊髓表面的脚板则附着在软膜内表面，彼此连接构成胶质界膜。在用尼氏法等一般染色组织切片中，星形胶质细胞的核比其他胶质细胞的核大，呈圆形或卵...

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软骨细胞的主要功能

软骨细胞：幼稚的软骨细胞位于软骨组织的表层，单个分布，体积较小，呈椭圆形，长轴与软骨表面平行，越向深层的软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形，染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的软骨细胞多2~8个成群分布于软骨陷窝内，这些软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下，软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。软骨细胞埋藏在软骨...

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小鼠原代肝窦内皮细胞的应用分析

小鼠原代肝窦内皮细胞分离自肝脏组织，是用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法，并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在...

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介绍小鼠成纤维细胞的传代流程

小鼠成纤维细胞分离自小鼠皮肤组织的贴壁细胞，成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞(mesenchymalcell)分化而来。功能活跃的细胞称为成纤维细胞。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。纤维细胞（fibrocyte），结缔组织中数目最多的细胞，相对静止的细胞称纤维细胞。成纤维细胞数目最多，胞体大，为多突的纺锤形或星形的扁平细胞，细胞核呈规则的卵圆形，细胞轮廓不清，具有突起。其形态尚可...

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小鼠单核巨噬细胞的注意事项！

1968年从雌性BALB/c小鼠的肿瘤中建立，J774A.1小鼠单核巨噬细胞在抗体依赖性吞噬作用中具有活性[Pubmed:1101071]。它们的生长受到硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制[Pubmed:318922]。它们合成大量溶菌酶并表现出轻微的细胞溶解作用，但主要是抗体依赖性吞噬作用。白细胞介素1β(Il1b)由这条线连续合成。小鼠单核巨噬细胞注意事项：1)该细胞大多数是贴壁状态，少量的悬浮细胞。细胞传代时使用细胞刮铲收集细胞。2)细胞传代：如果细胞密度达70%-90%...

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关于人胚肾细胞293T的培养步骤说明

人胚肾细胞293T是293细胞株插入SV40T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生细胞株。人胚肾细胞293T的培养步骤：1）培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液；2）无菌PBS或无菌生理盐水洗涤3次（按培养体积加入）；3）加入适量胰酶消化适当时间（一般胰酶为0.25%；9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，一次加入1mL胰酶。消化时间视细胞类型等多种情况综合考虑，一般如果是细胞株，非原代培养，消化1－2分钟足矣）；4）用枪头吹打数十次（视细胞类型而定。一般细胞株30...

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大鼠软骨细胞的制备要注意的事项

软骨细胞是软骨组织中的主要细胞成分。位于软骨陷窝中。软骨细胞的核小，呈圆形或椭圆形，有1至数个核仁，胞质略嗜碱性。细胞形状依软骨组织而异：在透明软骨，靠近软骨膜的细胞呈椭圆形，其长轴与软骨表面平行，深部的细胞逐渐变为圆形或卵圆形，常常两个或多个聚集成群，称为同源细胞群；在弹性软骨，细胞的形态基本上与透明软骨的相似；在纤维软骨，细胞略呈卵圆形，夹在胶原纤维束之间，单个存在、成对存在或排列成单行。大鼠软骨细胞分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激...

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