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小鼠脑微血管内皮细胞株  Bend.3

小鼠脑微血管内皮细胞株 Bend.3

简要描述:
Bend.3细胞转染了表达多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆转录病毒载体。
1) 来源:BALB/c小鼠脑
2) 形态:内皮细胞样 贴壁生长
3) 含量:>1x106 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。

更新时间:2021-08-19

访问量:75

产品型号:Bend3

厂商性质:生产厂家

品牌其他品牌应用领域医疗卫生,生物产业

      Bend.3 小鼠脑微血管内皮细胞株   

 

Bend.3Bend3

细胞鉴定

种属鉴定已通过

细胞来源

国家资源库

细胞背景

细胞转染了表达多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆转录病毒载体。观察到血管性血友病因子的表达及对荧光标记的低密度脂蛋白(LDL)的摄入确认其内皮细胞特性。bEnd.3 cells细胞可用细胞因子和脂多糖(LPS)诱导淋巴细胞的Peyer's结高内皮细胞受体,粘膜血管定居因子(MAdCAM-1) 及内皮细胞选择素的表达。肿瘤坏死因子 a (TNF alpha), 白介素 1 (IL-1)LPS的诱导作用是浓度及时间依赖的。代数较早的bEnd.3细胞未受刺激时在表面表达MAdCAM-1,但过了30代后就不表达了。细胞粘附分子 1 (ICAM-1)持续表达,并在LPS, IL-1 and TNF a处理后升高。30代前血管细胞粘附分子1 (VCAM-1)持续表达,但30代后不表达。 bEnd.3细胞中肿瘤坏死因子a (TNF alpha)可以诱导P-选择素的表达,30代后更强。 

细胞特性

 

1 来源:BALB/c小鼠脑

2 形态:内皮细胞样  贴壁生长

3 含量:>1x106  细胞数

4 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途:仅供科研使用。

培养条件

1) 准备DMEM ( 推荐awcell-128-0001NaHCO3 1.5g/LGIBCO,货号12800017,添加NaHCO3 1.5g/L) 培养基,优质胎牛血清,10%,双抗 1%

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%

注意事项:

 

注意:(bEnd.3细胞对培养基pH值的任何不平衡都很敏感。使用配方含有3.7 g / L碳酸氢钠的DMEM培养基培养细胞时为稳定培养基PH值,增加CO2是必要的,否则这些细胞不会很好地附着或增殖,细胞建议在空气,90%、二氧化碳,10%环境中培养。经验证在空气,95%;二氧化碳,5%的环境下使用含1.5 g / L碳酸氢钠的DMEM培养基会比较好,推荐使用含1.5 g / L碳酸氢钠的DMEM培养基+优质胎牛血清10%来培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T251-2mLT752-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml10%FBS的培养基来终止消化。 

3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

运输形式

低温:11mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系

常温2 T25瓶复苏的存活细胞常温发货,到后按照细胞接收后的处理方法操作。

生物安全:

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。


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