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人胚肾细胞293T

人胚肾细胞293T

简要描述:
人胚肾细胞293T/HEK-293T细胞是293T(293tsA1609neo)细胞系(ATCC CRL-11268)的衍生物。细胞持续表达SV40抗原,该细胞常用于转染实验,转染效率较高。

更新时间:2021-11-30

访问量:274

产品型号:hek-293T

厂商性质:生产厂家

品牌其他品牌应用领域医疗卫生,生物产业

                 HEK-293T 人胚肾细胞    

HEK-293T293T

l 细胞鉴定

STR鉴定已通过

l 细胞来源

国家资源库

l 细胞背景

HEK-293T细胞是293T293tsA1609neo)细胞系(ATCC CRL-11268)的衍生物。细胞持续表达SV40抗原,该细胞常用于转染实验,转染效率较高。(转染一般以50%密度铺板,待细胞刚刚贴到皿壁上后(一般8-10小时),即可进行转染操作)

l 细胞特性

1 来源:人胚胎肾脏

2 形态:上皮细胞样,贴壁生长,贴壁能力较弱

3 含量:>1x106  细胞数

4 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5 用途:仅供科研使用

l 培养条件

1) 准备DMEM(推荐awcell-0001)培养基;优质胎牛血清,10%;L-谷氨酰胺(2mM)1%;NEAA  1% ; 双抗 1%

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%

l 注意事项:

人胚肾细胞293T该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法:

1. 收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T251-2mLT752-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml10�S的培养基来终止消化。

3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

人胚肾细胞293T细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

l 运输形式

低温:(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

常温(2) T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

l 生物安全:

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

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