小鼠单核巨噬细胞白血病细RAW264.7

l 细胞鉴定                 

种属鉴定已通过                    

l 细胞背景                 

此细胞株源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。此细胞株不分泌可检测到的病毒颗粒，XC斑点形成试验阴性。可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。                                        

l 细胞特性                    

1） 来源：鼠科白血病病毒诱导的肿瘤；单核细胞；巨噬细胞。      

2） 形态：不规则圆形，纺锤状，贴壁细胞，少量悬浮。                    

3） 含量：>1x106  细胞数。                    

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装。                    

5） 用途：仅供科研使用。                    

l 培养条件                    

1） 准备DMEM(包含2mM L-谷氨酰胺，0.11g / L丙酮酸钠) (推荐awcell-0001)培养基；优质胎牛血清10 %；P/S青霉素-链霉素 1%。                    

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。                    

l 注意事项                    

注意事项：                    

（a）在细胞生长的初始阶段，细胞以贴壁的形式生长并呈现出长方体的形态和有“伪足”延伸。随着培养时间的增加，细胞呈现圆形并以叠加的形式生长。细胞密度达到一定的程度，会有细胞以悬浮的方式散落到到培养基中，镜下观察会发现悬浮和贴壁的细胞会同时出现。                    

（b）该细胞传代时不需要用胰酶消化。传代时，用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落，收集离心后重悬接种到新的培养瓶中。                    

（c）该细胞形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形。当细胞密度较大时，细胞会轻微脱落变圆或者许多细胞堆积在一起，有些细胞甚至脱落漂浮。这些漂浮的细胞是存活的，在传代时应收集起来，离心后细胞沉淀可以继续培养。

（d）血清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化，应选用高质量的胎牛血清。                    

该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞，传代可以参考以下方法：                    

该细胞用细胞刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌细胞刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落，收集细胞后离心去上清，重悬后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。收货后第一次传代1:2进行，后续可以根据实际的情况以1:2~1:4的比例进行传代。                    

3） 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。                    

l 运输形式                    

低温:（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。                    

常温: （2） T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。                    

l 生物安全                    

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。                    

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。