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大鼠心肌原代细胞的处理方法介绍

更新时间:2023-02-13  |  点击率:515
  心肌细胞培养作为一种体外研究模型,可以更便捷的从细胞和分子水平对其生长、发育、生理、代谢、病理等进行研究。在许多研究领域原代培养心肌细胞作为一种主要的研究模型,被广泛应用于心血管研究之中。
  原代心肌细胞培养是体外研究心血管疾病相关机制的主要手段和基本技术。基础实验中,与细胞系相比,原代心肌细胞的形态及电生理方面更接近在体细胞,因此,培养原代心肌细胞的质量直接关系实验的进程及结果。
  大鼠心肌原代细胞的处理方法,给大家分享:
  1.大鼠的选择
  新生大鼠鼠龄的选择新生大鼠心肌细胞在出生后3 d内具有部分的增殖能力,成年大鼠心肌细胞则为终末分化细胞,不再具有分裂增殖能力。因此,大鼠出生时间越短,其心肌细胞分离后成活率越高,越容易贴壁生长。大量观测表明,选择1~3 d龄大鼠分离其心肌细胞进行原代培养较为理想.其中尤以半日龄大鼠心肌细胞培养效果较好。
  2.最常见的酶消化法
  0.1%的胰蛋白酶重复消化乳鼠心肌组织多次,收集的细胞用含15%胎牛血清的MEM培养基混悬后过滤,纯化心肌细胞后置CO2培养箱孵育。结果培养的心肌细胞4~6 h后开始贴壁生长,12~24 h明显增殖,3~4 d后细胞汇合成片。在倒置显微镜下心肌细胞呈圆形,梭形,多角形,伸出伪足,出现自发性节律性搏动。结论应用酶消化法可简便,快速地获得大量活力高的心肌细胞。