小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1的储存要注意的事项

从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆。从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。MC3T3亚克隆4（ATCCCRL-2593）和MC3T3亚克隆14（ATCCCRL-2594）在抗坏血酸和3到4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质（ECM）。MC3T3亚克隆24（ATCCCRL-2595)和MC3T3亚克隆30(ATCCCRL-2596)在抗坏血酸中生长表现出很差的成...

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小鼠成纤维细胞L929传代流程的注意事项

小鼠成纤维细胞L929分离自小鼠皮肤组织的贴壁细胞，成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞(mesenchymalcell)分化而来。功能活跃的细胞称为成纤维细胞。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。纤维细胞（fibrocyte），结缔组织中数目最多的细胞，相对静止的细胞称纤维细胞。成纤维细胞数目最多，胞体大，为多突的纺锤形或星形的扁平细胞，细胞核呈规则的卵圆形，细胞轮廓不清，具有突起。其...

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介绍DC细胞的两种来源途径

树突状细胞（Dendriticcells,DC）是机体功能较强的专职抗原递呈细胞，它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原，未成熟DC具有较强的迁移能力，成熟DC能有效激活初始型T细胞，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。DC的来源有两条途径：①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC，称为髓样DC，也称DCl，与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞；包括朗格汉斯细胞，间皮（或真皮）DCs以及单核细胞衍生的DCs等，②来源于淋巴样干细胞，称为淋巴样DC或浆细胞样DC，即DC2，...

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骨髓间充质干细胞常用的分离方法有哪些

骨髓间充质干细胞是骨髓基质干细胞，是人们在哺乳动物的骨髓基质中发现的一种具有分化形成骨、软骨、脂肪、神经及成肌细胞的多种分化潜能的细胞亚群。它们对骨髓中的造血干细胞（HSC）不仅有机械支持作用，还能分泌多种生长因子（如IL-6，IL-11，LIF，M-CSF及SCF等）来支持造血。目前常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法，全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性，定期换液除去不贴壁细胞，从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中各细胞...

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人脐静脉内皮细胞系HUVEC的使用注意事项

血管内皮细胞对维持血管动态平衡起着重要作用。它们合成、分泌凝血和纤溶系统的激活因子和抑制因子、影响血小板粘附和聚集的调节因子。内皮细胞还释放控制细胞增殖和调节血管壁紧张度的分子。这些过程都可以用培养的细胞进行体外研究，人脐静脉和动脉内皮细胞是这类研究中常用的细胞类型。除了普通的内皮细胞特征例如“鹅卵石状”，VIII因子阳性着色，能摄取乙酰基化低密度脂蛋白，人脐血管内皮细CD31染色阳性。用IL-1或TNF-α预先处理过的细胞也能选择性地表达E-selectin和VCAM。人脐...

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大鼠心肌细胞的特点及运输保存

心肌的工作细胞包括心房肌和心室肌。心肌细胞为短柱状，一般只有一个细胞核，心肌细胞之间有闰盘结构。该处细胞膜凹凸相嵌，并特殊分化形成桥粒，彼此紧密连接，但心肌细胞之间并无原生质的连续。心肌细胞的细胞核多位于细胞中部，形状似椭圆或似长方形，其长轴与肌原纤维的方向一致。肌原纤维绕核而行，核的两端富有肌浆，其中含有丰富的糖原颗粒和线粒体，以适应心肌持续性节律收缩活动的需要。大鼠心肌细胞的细胞特性：1)组织来源于实验动物的正常心脏组织。2)细胞鉴定：肌球蛋白重链(MHC)免疫荧光染色为...

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Ⅱ型肺泡细胞在调节肺免疫防御中起重要作用

Ⅱ型肺泡细胞指的是大肺泡细胞，又称分泌细胞。分泌表面活性物质(二棕榈酰卵磷脂)，以降低肺泡表面张力。肺巨噬细胞，来自于血液单核细胞。吞噬了较多尘粒的被称为尘细胞，而心衰细胞则是心力衰竭患者肺内出现的吞噬了血红蛋白分解的含铁血黄素的巨噬细胞。肺泡与肺部毛细血管紧密相连。两者的膜大部分融合，有助于气体的快速扩散。而肺泡表面液体层，Ⅰ型肺泡细胞与基膜，薄层结缔组织，毛细血管基膜与内皮组成了所谓的气一血屏障。细胞较小，成立方形或圆形，散落在I型肺泡细胞之间。核圆形，胞质着色浅，呈泡沫...

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介绍小鼠海马神经元细胞HT22培养的注意事项

海马椎体神经元是海马区的主要成分，主要功能是参与近期记忆、情绪及内脏功能调节、是老年性痴呆、癫痫等疾病的主要病灶之一。小鼠海马神经元细胞HT22培养是研究神经细胞生物学特性和外源干扰因素作用(细胞因子)的有效细胞模型，其在神经生物学，发育生物学体外实验研究中已被广泛应用。一、传代培养传代前准备--胰蛋白酶消化--吹打分散细胞--分装稀释细胞--继续培养1)将培养瓶内旧的培养液弃掉，然后用D-Hanks液洗两次，(一定要洗干净，以免影响胰酶的消化作用)。2)加入0.25%胰酶-...

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